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首頁 > 工程技術論文 > 一般工業技術 > 發酵乳中乳酸菌計數不確定度的評定

發酵乳中乳酸菌計數不確定度的評定

2018-07-27 10:33:38 字體:   打印 收藏 

摘 要:目的:對發酵乳中乳酸菌計數不確定度的來源進行分析。方法:本文依據GB4789.35-2016《食品安全國家標準食品微生物學檢驗乳酸菌檢驗》進行測定,根據JJF1056.1-2012《測量不確定度評定與表示》與SN/T4091-2015/ISO/TS19036:-2006《食品微生物學測量不確定度評估指南》對不確定度來源進行分析和評定。結果:乳酸菌計數過程中發散是引起不確定度的主因,同一樣品重復測定結果的擴展不確定度為0.051 5(p=95%,%,k=2.26),一組樣品重復測定結果的擴展不確定度為0.070 9(p=95%,k=2.23)。結論:合理選擇評定方法,采用合并樣本標準差的方法來評定乳酸菌檢驗的不確定度。

關鍵詞:發酵乳;乳酸菌計數;不確定度

 乳酸菌是-一類可發酵糖主要產生大量乳酸的細菌的通稱[1]。GB19320-2010中規定發酵乳產品中的乳酸菌數不得低于1×106 CFU/g((mL)),乳酸菌的含量是評價產品對于人們營養與健康作用的重要指標[2],因而測量結果的可用性值得高度關注。一切定量結果都不可避免具有不確定度,測量不確定度是根據所用到的信息,表征賦予被測量量值分散性的非負參數。目前,GB/T27025-2008《檢測和校準實驗室能力的通用要求》(ISO/IEC17025-2005《檢測和校準實驗室能力認可準則》)[3,-4]指出:適當時,要對測量結果的不確定度進行評定。CNAS-CL09:-  2013《檢測和校準實驗室能力認可準則在微生物檢測領域的應用說明》中也指出:在微生物檢測領域,某些情況下,應對測量不確定度進行合理的評估[5]!秾嶒炇屹Y質認定評審準則》中對不確定度也有要求: :當不確定度影響到對結果符合性的判定時,報告中還需要包括不確定度的信息。本研究依據最新版GB4789.35-2016[1]《食品安全國家標準食品微生物學檢驗乳酸菌檢驗》[1]的規定對發酵乳中乳酸菌總數進行測定。為保證數據的準確可靠,可根據JJF1056.1   -2012《測量不確定度評定與表示》與SN/T4091-2015/ISO/TS19036:-2006《食品微生物學測量不確定度評估指南》[6,-7]中有關規定對乳酸菌總數進行不確定度分析,找出乳酸菌檢測過程中的關鍵控制點[8],為驗證實驗室對微生物的檢測、計數的準確度和精密度方面的能力提供理論參考。   1 材料與方法   1.1 樣品、儀器與培養基   樣品為:市售酸奶;。   儀器:生化培養箱(型號:BSP-250),冰箱,均質器,無菌均質袋,立式自動壓力蒸汽滅菌器(GR850DF,致微儀器有限公司),厭氧袋,天平,無菌試管,無菌吸管,生理鹽水;。   培養基:MRS培養基,MC培養基。   1.2 檢測方法   1.2.1 取樣與稀釋:   樣品的全部制備過程均應尊循遵循無菌操作程序。稱取酸奶樣品25 g于裝225 mL   生理鹽水的無菌均質袋中,用拍擊式均質器拍打1min~2 min制成1:∶10的樣品勻液。用1 mL無菌吸管吸取1:∶10的樣品勻液1 mL,沿管壁緩慢注于裝有9 mL生理鹽水的無菌試管中,制成1:∶100的樣品勻液,按上述操作順序,做10倍遞增樣品勻液,每遞增稀釋一次,即換用1次1 mL滅菌吸管。   1.2.2 稀釋倍數選擇:   根據平常實驗經驗,酸奶中乳酸菌計數(GB4789.35-2010版標準)一般選擇10-5、10-6稀釋度,根據GB4789.35-2016版標準,本實驗選擇10-6、10-7、10-8三 3個稀釋度。   1.2.3 傾注平板、培養與計數:   將冷卻至48 ℃的MRS瓊脂培養基傾注入有稀釋液的平皿中,轉動平皿混勻。(36℃±1)℃ 厭氧培養(72h±2)h。培養后計數平板上的所有菌落數。   2 結果與分析   2.1 結果報告原則   選取菌落數在30-~300 CFU之間、無蔓延菌落生長的平板計數菌落總數。,單位以CFU/mL表示。   2.2 建立數學模型   由于只有一個稀釋度平板上的菌落數在適宜計數范圍內,因此計算該稀釋度平板上的菌落數乘以該稀釋度,即為乳酸菌計數結果,公式為:   (1)   式(1)中:N——為樣品中菌落數; X——為平板上的菌落數; d——為稀釋度。   2.3 不確定度的來源   檢測中不確定度的來源主要有:樣品本身的均勻性、取樣的重復性、操作者、培養時間、設備、培養基、試劑及玻璃量具等。與一般的側量比較,微生物同一樣品重復測量的結果相差極大,即結果的分散性較大。隨機效應帶來的樣本重復性偏差是獲取測量不確定度的主要因素,即A類評定。本實驗主要采用A類評定測量不確定度,同時考慮了B類不確定度對合成不確定度的貢獻。   2.4 不確定度的評定   2.4.1同一樣品的重復測量結果的不確定度評定[9-12]   依據GB 4789.35-2016《食品微生物學檢驗 乳酸菌檢驗》進行檢驗,,在重復性條件下對同一個酸奶樣品進行了10次獨立性測試,由于乳酸菌的數量分布在108和109數量級,計算出的樣本標準差很大,因此對實驗數據取對數后進行計算[9-12],結果和中間計算值,見表1。   表1 1 重復測量結果和中間計算值表   Table 1 Evaluation results of the repeat measurement of fermented milk   序號測量結果X/(CFU/mL)[a2] 殘差平方和取值區間   logX((dB))X((108))   11 140 000 0009.0570.0390.001 58.966 59.069 59.312   21 020 000 0009.009-0.0090.000 1   3980 000 0008.991-0.0270.000 7   4960 000 0008.982-0.0360.001 3   51 220 000 0009

期刊簡介

名稱:現代食品

主辦:中糧工程科技(鄭州)有限公司

期刊簡介:

《現代食品》雜志是經國家新聞出版總署正式批準辦刊的國家級刊物,由中糧工程科技有限公司主管,中糧工程科技(鄭州)有限公司主辦,并由現代食品雜志社編輯出版的綜合性食品方面的學術性期刊。國內統一刊號:CN 41-1434/TS,全國公開發行。更多>>

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